PRACTICA # 3

viernes 24 de septiembre del 2010

El dia de hoy realizamos la practica num. 3 en la cual teniamos como finalidad ver como actua la pepsina sobre  las proteinas.

Digestión de la albúmina por “pepsina” industrial

 

INTRODUCCION: 

El jugo gástrico, elaborado por las glándulas de la mucosa del estómago, contiene ácido clorhídrico libre y dos enzimas: quimosina y pepsina. En realidad ambas son secretadas como proenzimas inactivas, y en presencia del ácido clorhídrico se transforman espontáneamente en enzimas activas.

Durante la digestión de las proteínas (polímeros de aminoácidos) se hidrolizan los enlaces peptídicos de estas moléculas. Este proceso se inicia en el estómago por acción de las pepsinas que rompen las uniones (enlaces peptídicos) a  nivel de los aminoácidos fenilalanina y tirosina, de manera que los productos de la digestión gástrica de las proteínas son polipéptidos de muy diversos tamaños. La mayor parte de la digestión de proteínas se produce en el intestino delgado, donde los productos de la digestión gástrica son hidrolizados hasta aminoácidos, primero por la acción de las enzimas proteolíticas del jugo pancreático y después por las enzimas asociadas a las células de las microvellosidades.

Una reacción característica de los polipéptidos es la reacción de Biuret, las proteínas y los aminoácidos no dan positiva esta reacción.

HIPOTESIS:  

 

Como sabemos la pepsina es una enzima que necesita del ácido clorhídrico para activarse y poder romper los enlaces de la proteínas. estas reacciones se llevan acabo en el estomago, principalmente en e intestino delgado y es conocido como digestión química obteniéndose como resultado aminoácidos. 

OBJETIVOS:

·          Identificar la acción de la pepsina sobre las proteínas

·          Identificar los productos de la acción de la pepsina sobre las proteínas

·          Comprender la acción de los jugos gástricos en la digestión química del alimento

·          Conocer cómo se puede activar una enzima

MATERIAL:

1 vaso de precipitados de 1000 ml

Papel filtro

1 embudo

1 probeta de 100 ml

1 gradilla

4 tubos de ensayo

4 probetas de 10 ml

Gasas

MATERIAL BIOLOGICO

Claras de huevo

SUSTANCIAS

Ácido clorhídrico 0.1 N

Reactivo de Biuret

Pepsina

EQUIPO

1 balanza granataria electrónica

1 parrilla con agitador magnético

PROCEDIMIENTO

Bate la clara de huevo cruda en un litro de agua fría, y llévala hasta la ebullición, sin dejar de batir. Fíltrala. El líquido que se obtiene es una fina suspensión, muy estable, de albúmina desnaturalizada.

Prepara, por otro lado, jugo gástrico artificial, diluyendo en 100 ml de agua, 1 g de jugo gástrico desecado, que se vende en las farmacias bajo la denominación de “pepsina”, nombre que proviene de la enzima principal que contiene.

Prepara en cuatro tubos de ensayo, las siguientes mezclas:

1.    6 ml de albúmina + 6 ml de agua.

2.    6 ml de albúmina + 1,5 ml de agua + 4,5 ml de HCl, 0.1 N.

3.    6 ml de albúmina + 1,5 ml de pepsina + 4,5 ml de agua

4.    6 ml de albúmina + 1,5 ml de pepsina + 4,5 ml de HC1,  0.1 N.

A continuación coloca los tubos a baño María, a 40° C. Algunos minutos más tarde, únicamente en el tubo 4 se producirá un aclarado, esto es consecuencia de la actividad de la pepsina que, en medio ácido, ha hidrolizado a la albúmina.

OBSERVACIONES.

Lo que pudimos observar fue el color que tomo nuestra muestra, primero fue un tono morado, pero muy claro, casi transparente; despues fue tomando un color amarillo, por ultimo alcanzo un color cafe oscuro, pero principalmente este tono se concentraba en la parte inferior del tubo de ensayo, entre mas transcurria el tiempo, se fue formando como un anillo blanco en la parte superior del tubo.

RESULTADOS:

Contenido del tubo      Reacción Biuret
Albúmina + agua
Albúmina + agua +ácido clorhídrico
Albúmina + pepsina + agua
Albúmina + pepsina +ácido clorhídrico

CONCLUSIONES:

Las proteínas son macromoléculas que constituyen el principal  nutriente para la formación de los músculos del cuerpo.En las proteínas están codificadas en el material genético de cada organismo y en él se especifica su secuencia de aminoácidos. Estas secuencias de aminoácidos se sintetizan por los ribosomas para formar las macromoléculas que son las proteínas. 
La hidrólisis es la descomposición de sustancias orgánicas e inorgánicas complejas en otras más sencillas por acción de agua. 

El enlace peptídico es un enlace amida que se establece entre dos  aminoácidos. En la formación del enlace amida se produce una reacción  química entre el grupo amino de un aminoácido y el grupo carboxilo del otro, formándose un enlace covalente entre el átomo de carbono y el de nitrógeno con la pérdida de un grupo OH y un H para forman una molécula de agua. El ribosoma cataliza la formación sucesiva y ordenada de una serie de enlaces peptídicos entre distintos aminoácidos en el proceso de la síntesis de proteínas. 

Esta sucesión de enlaces peptídicos fija la secuencia primaria de una proteína y su configuración. Cualquier variación de esta secuencia requiere de la rotura del enlace peptídico. La digestión química, a traves de reacciones biológicas donde intervienen enzimas, hace que los nutrientes se transformen en 

moléculas sencillas a partir de otras más complejas.

W DE GOWIN

LUNES 20 DE SEPTIEMBRE DEL 2010

El día de hoy la profesora comenzo a hablarnos sobre la biosíntesis, la cual la definió como la descomposición o digestión de moléculas complejas a moléculas mas sencillas. 

Nos explico que las moléculas complejas se descompone o degradan en moléculas mas simples, para así convertirse en energía, realizar la síntesis de proteínas y lo que resta es utilizado como reserva.  

Por otro lado nos dio la definición de metabolismo, la cual  nos dice que metabolismo es el conjunto de reacciones química que se llevan acabo en el organismo, en estas reacciones encontramos al anabolismo; que es la biosíntesis, es decir construye, y por el otro lado tenemos al catabolismo, que de encarga de destruir o degradara los nutrientes. 

Un dato que nos dio la profesora, es que un niño tiene un anabolismo mayor, pero cuando estamos en una edad adulta, hay un equilibrio entre el anabolismo y el catabolismo pero finalmente cuando se llegue a una edad mayor el catabolismo es el que predomina entres estas dos funciones.

                                                                                                                                

También vimos que absorción es la incorporación de nutrientes al intestino delgado, y de ahí a las células del cuerpo para finalmente llegar a la sangre.

Después de habernos dado esta explicación, procedimos a la exposición de las W de gowin, en donde pudimos darnos cuenta que se nos dificultaba realizar el ¿que? y el ¿como?, una vez que la profesora, dijo en que estaban mal, les pidio que lo corregieran. Despues pasamos a la exposicion de los mapas conceptuales y del glosario de la lectura 2, nos hablo un poco sobre la historia evolutiva del ser humano.

Finalmente nos dijo la profesora que la siguiente clase realizariamos practica, por lo tanto debiamos llevar el siguiente material: una clara de huevo por equipo, bata y la hipotesis de la practica 3.

viernes 17 de septiembre del 2010

 

POR DISPOSICION OFICIAL ( DEBIDO A FIESTAS PATRIAS) NO HUBO CLASES.

lunes 13 de septiembre del 2010

 

Tercer y ultimo dia que trabajamos en la sala telmex, se supone que hoy debimos  haber acabado las actividades que nos faltaban, para porder terminar las actividades debiamos realizar un postest. Como algunos todavia no llegamos a esa parte, la profesora nos dijo que lo terminaramos en la casa, ya que el viernes siguiente no habria clases.

viernes 10 de septiembre del 2010

La clase hoy, nuevamente se realizo en la sala telmex, continuamos con el tema de digestion, pero aora estaba mas enfocado hacia el anabolismo, biosintesis y  catabolismo. En esta ocasion vimos unos videos donde nos explicaban que era lo que sucedia en el anabolismo y el catabolismo. Para reafirmar lo que habiamos visto teniamos que realizar de nuevo el lego virtual, pero esta vez no solo lo armariamos, si no que despues de esto debiamos ir quitando pieza por pieza.

Nuevamente realizamos un cuestionario, y antes de retirarnos nos dijo la profesora que teniamos que regresar la clase siguiente para finalizar con la actividad, y que teniamos que realizar la lectura 2, con su mapa conceptual y la W de gowin de la practica 2

LUNES 6 DE SEPTIEMBRE DEL 2010

El dia de hoy trabajamos en la Sala Telmex, en donde realizamos unas actividades que tenia relacion con el tema que estamos viendo, es decir; DIGESTION.

Las actividades que se realizaron, fueron cuestionarios, donde nos pedian que explicaramos el por que habiamos escogido esa respuesta.

Otra actividad que realizamos fue el lego virtual, donde teniamos que escoger una figura e irla armando, esto lo relacionabamos con la biosintesis, tambien realizamos una silueta de bart, donde teniamos que señalar los organos del aparato digestivo, asi como esquemas donde redactariamos lo que habiamos entendido, por ultimo teniamos que participar en un foro, ahi , dariamos nuestra opinion sobre las actividades que realizamos.

Como las actividades eran un poco largas, no las terminamos en ese mismo dia, y la profesora nos dijo que tendriamos que regresar a la siguiente clase, para finalizar con la actividad.

PRACTICA # 2

viernes 3 de septiembre del 2010

El dia de hoy realizamos la practica num. 2 en donde teniamos como finalidad observar e inferir como es que actua la amilasa sobre el almidon

ACCION DE LA AMILASA SOBRE EL ALMIDON 

Introducción: 

La amilasa, denominada también ptialina o tialina, es un enzima hidrolasa que tiene la función de digerir el glucógeno y el almidón para formar azúcares simples, se produce principalmente en las glándulas salivares (sobre todo en las glándulas parótidas) y en el páncreas. Tiene un pH de 7. Cuando una de estas glándulas se inflama aumenta la producción de amilasa y aparece elevado su nivel en sangre.
Fue la primera enzima en ser identificada y aislada por Anselme Payen en1833, quien la bautizó en un principio con el nombre de diastasa.
En pocas palabras, en biología es una enzima presente en la saliva, que hidroliza el almidon de todo alimento.
En química, la reacción o prueba de Benedict identifica azúcares reductores (aquellos que tienen su OH anomérico libre), como lalactosa, la glucosa, la maltosa, y celobiosa. En soluciones alcalinas, pueden reducir el Cu2+ que tiene color azul a Cu+, que precipita de la solución alcalina como Cu2O de color rojo-naranja. El reactivo de Benedict consta de:
     Sulfato cúprico;
     Citrato de sodio;
     Carbonato anhidro de sodio.
     Además se emplea NaOH para alcalinizar el medio. 
 
El fundamento de esta reacción radica en que en un medio alcalino, el ion cúprico (otorgado por el sulfato cúprico) es capaz de reducirse por efecto del grupo Aldehído del azúcar (CHO) a su forma de Cu+. Este nuevo ion se observa como un precipitado rojo ladrillo correspondiente al óxido cuproso (Cu2O). 

HIPOTESIS.

Como sabemos, el almidón es un polisacárido y la amilasa una enzima entonces esta romperá los enlaces de almidón y dará como resultado la amilosa,  amilopectina y finalmente glucosa. A prueba del yodo o el lugol permite identificar la presencia de almidón pues tomará un color azul mientras que la prueba de Benedict permite identificar a los azucares reductores y para saber si es positivo el color que tomará será rojo ladrillo.

Objetivos: 

•     Identificar la acción de la amilasa de la saliva sobre el almidón

•     Identificar los productos de la acción de la amilasa sobre el
almidón
•     Caracterizar la digestión enzimática realizada por la secreción de
las glándulas salivales.

Material:

Papel filtro
Embudo
5 tubos de ensayo
2 goteros
2 cápsulas de porcelana 

Material biológico: 

Muestra de saliva 

Sustancias: 

Agua destilada
Almidón
Reactivo de Benedict
Reactivo de Lugol para almidón 

Equipo: 

Balanza granataria electrónica 

Parrilla con agitador magnético 

Procedimiento: 

A. Obtención de la enzima amilasa . Después de enjuagar la boca, mastica un trozo de papel filtro  para estimular la salivación. Los líquidos segregados se van pasando a un embudo que tenga un papel filtro, el filtrado se coloca en un tubo de ensayo hasta obtener 1  ml. 

La saliva así obtenida se diluye empleando 1ml de saliva y 10 ml de agua destilada, así se obtiene la preparación de enzima base. 

Se prepara una solución al 2% de almidón, para lo cual se pesan 2 g de almidón y se disuelven en 100 ml de agua destilada.

Se colocan 2 ml de agua destilada en un tubo de ensayo se le agregan 2 ml de la solución de almidón al 2% y 2 ml de la solución base de la  enzima. En otro tubo se colocan 2 ml de agua destilada y se le agregan 2 ml de la solución de almidón al 2%.

Los tubos se colocan en baño maría a 37° C, durante 15 minutos dejando que la amilasa vaya hidrolizando al almidón 

Una vez transcurridos los 15 minutos se sacarán los tubos del baño maría y se harán las pruebas del lugol y Benedict 

B. Reacciones de lugol para almidón y Benedict La prueba del yodo o el lugol permite identificar la presencia de almidón, con este reactivo se obtiene un color azul-violeta característico. Toma 1 ml de la disolución de cada uno de los tubos y añade unas gotas de lugol a cada una de ellas. Si no existe la  hidrólisis del almidón la prueba será positiva. 

La prueba de Benedict permite identificar a los azucares reductores. Toma 1 ml de cada uno de las disoluciones de los tubos y agrégales 1 ml del reactivo de Benedict, enseguida coloca ambos tubos en baño María, si existe hidrólisis del almidón se formará un precipitado rojo ladrillo que indica la presencia de azúcares como la glucosa y la maltosa.

RESULTADOS:

Contenido del  Tubo     Reacción de Lugol      Reacción de Benedict
Amilasa+ almidón +agua
Almidón+agua 

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CONCLUSION:

Al combinar las saliva y el almidon ambos ya disueltos en agua destila a35° con lugol y benedict al espera su reaccion se obtuvo un color azul intenso acercandose a morado en la mezcla de lugol y alimidon.
En la mezcla de benedict y amilasa (saliva) se obtuvo un color rojo ladrillo. Se confirmó que se efectuó la reaccion esperada.